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Bonnes pratiques de prélèvement pour l'isolement d'Haemophilus parasuis

Bien qu'Haemophilus parasuis puisse être détecté sur des prélèvements réalisés sur des cas cliniques par PCR, son isolement, parfois difficile, e...
18 Mars 2005
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Bien qu'Haemophilus parasuis puisse être détecté sur des prélèvements réalisés sur des cas cliniques par PCR, son isolement, parfois difficile, est nécessaire pour une caractérisation supplémentaire par sérotypage et génotypage. Les facteurs pouvant jouer sur le succès de cet isolement portent sur le choix des animaux prélevés et le traitement des prélèvements avant leur envoi au laboratoire.
On trouvera ci-dessous les méthodes permettant d'améliorer la prise d'échantillons et leur traitement afin de pouvoir réaliser correctement l'isolement.

Choix des animaux

Il faut tenir compte du fait que:

  • Haemophilus parasuis peut rarement être isolé à partir d'animaux morts ou atteints de maladie chronique.
  • L'isolement peut être tenté sur des prélèvements de porcs sacrifiés non traités avec des signes cliniques caractéristiques de maladie aigüe.
  • Les meilleurs prélèvements sont ceux issus d'animaux avec des problèmes respiratoires (respiration abdominale, toux) et avec des articulations enflées; on peut aussi prendre en compte les animaux atteints de symptômes du système nerveux central.

Choix des échantillons

  • Etant donné que H. parasuis est un organisme commensal de l'appareil respiratoire supérieur, on peut l'isoler de la cavité nasale, des amygdales et de la trachée d'animaux sains, il est préférable de prendre des échantillons du tractus respiratoires sur d'autres organes.
  • Les meilleurs organes pour l'isoler sont le cerveau (méninges), le péricarde, la plèvre, le péritoine et les articulations.
  • En cas de pleurésie fibrineuse, on peut prendre des échantillons de tissu pulmonaire.
  • Bien qu'H. parasuis puisse entraîner une septicémie et être présent dans le sang pendant l'infection aigüe, il est peu fréquent de l'isoler à partir de ce type de matériel dans les cas terrain.

Prise d'échantillons

  • Les prélèvements doivent être réalisés avec des écouvillons stériles à partir d'organes avec un exsudat fibrineux en surface ou bien à partir des'articulations, du péritoine, du péricarde et de la cavité thoracique avec des seringues stériles.
  • Les échantillons doivent être immédiatement réfrigérés après la récolte.
  • Ils doivent être envoyés en utilisant un milieu de transport.

Transport vers le laboratoire

  • Il faut prendre en compte le fait qu'H. parasuis est un organisme thermosensible, sa viabilité peut être mise en cause à 42°C en 1 heure, à 37°C en 2 heures et à 25°C en 8 heures en milieu physiologique salin.
  • En revanche, il peut survivre à 4 ºC pendant un temps relativement long.
  • Les échantillons à analyser doivent être arrivés au laboratoire dans les 1 à 2 jours suivant leur récolte.
  • Les écouvillons, les échantillons de tissus ou les seringues avec des liquides corporels doivent être transportés dans un emballage en polystyrène extrudé avec de la glace.
  • Pour les tissus, il ne faut pas utiliser de formol.

Analyses de diagnostic

  • On doit d'abord réaliser l'identification biochimique.
  • Il est possible de caractériser les isolats par sérotypage et génotypage.
  • Quand l'isolement est impossible, la détection d'H. parasuis par PCR à partir d'échantillons cliniques peut être utile pour connaître le rôle de cet agent dans la mortalité touchant l'élevage.

Simone Oliveira. Improving rate of success in isolating Haemophilus parasuis from clinical samples. J Swine Health Prod. 2004;12(6):308-309.

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